Статья посвящена актуальной проблеме дифференциальной диагностики заболеваний вирусной этиологии у сельскохозяйственных животных. Вирусные заболевания на настоящий момент имеют широкое распространение, занимают ведущее место в инфекционной патологии сельскохозяйственных животных, нанося огромный экономический ущерб. С учетом масштабов вакцинопрофилактики животных, для повышения эффективности противоэпизоотических мер остро стоит вопрос разработки методов быстрого и эффективного выявления и дифференциации полевых и вакцинных штаммов вируса инфекционного ринотрахеита у крупного рогатого скота. Рассматривается возможность применения полимеразной цепной реакции для идентификации и дифференциации вакцинного штамма от эпизоотических штаммов и изоляторов вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. В процессе исследований разработан метод ПЦР-ПДРФ анализа для обнаружения вируса ИРТ в испытуемом материале. Метод ПЦР-ПДРФ анализа применяли для идентификации и дифференциации вакцинного штамма ТК-А от эпизоотических штаммов и изоляторов вируса ИРТ крупного рогатого скота. Принцип ПЦР, основанный на многократном повторении циклов ДНК, отжига и синтеза, что приводит к увеличению количества специфических фрагментов ДНК возбудителя, позволяет учитывать результаты ПЦР в агарозном геле. Время анализа около 30 часов. Чувствительность обнаружения вирусной ДНК составляет 1-10 пикограмм (10 2 ТЦД). Благодаря таким характеристикам, как относительная простота и скорость реакции, высокая чувствительность, специфичность и воспроизводимость, в последнее время ПЦР получила широкое распространение в фундаментальных и прикладных исследованиях в различных областях биологической науки, включая ветеринарную вирусологию. Результаты, полученные при проведении исследований, показывают, что применение ПЦР-ПДРФ позволяет дифференцировать полевые и вакцинные штаммы и изоляты вируса ИРТ с высокой степенью достоверности. Использование ПЦР-ПДРФ анализа повышает эффективность и информативность исследований в области молекулярной эпизоотологии ИРТ крупного рогатого скота, поскольку позволяет не только идентифицировать ДНК разных штаммов вируса независимо от их природы, но и проводить дифференциацию между ними, в том числе дифференцировать штамм ТК-А, используемый для производства аттенуированных вакцин от эпизоотических штаммов и изолятов вируса.
Открыть статью
Аннотация:
Год выпуска журнала:
2020
Номер журнала:
2(78)
Ключевые слова: полимеразная цепная реакция, инфекционный ринотрахеит, диагностика, изолят, штамм, маркер